美國藥典地塞米松含量測定和有機雜質(zhì)的LC-UV分離檢測方法
地塞米松是一種廣泛用于抗炎和免疫抑制作用的皮質(zhì)類固醇。本文中的液相色譜-紫外檢測地塞米松有機雜質(zhì)的應(yīng)用是基于美國藥典USP 的官方方法。我們將Phenomenex Kinetex 1.7μm C18 100 x 2.1mm 核-殼型液相色譜柱與USP色譜方法中使用的某色譜品牌1.7μm C18柱的結(jié)果進行了比較。其中，用于含量測定和有機雜質(zhì)分析的標(biāo)準(zhǔn)溶液和系統(tǒng)適用性溶液是根據(jù)美國藥典專論進行制備的。
兩支色譜柱均滿足含量測定的系統(tǒng)適用性要求:地塞米松峰對稱度NMT（不超過）2.0，地塞米松相對標(biāo)準(zhǔn)偏差NMT（不超過）0.73 %，倍他米松和地塞米松之間的分離度NLT （不小于）1.5。兩支色譜柱均滿足有機雜質(zhì)測定的系統(tǒng)適用性要求:地塞米松和三種雜質(zhì)的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差NMT（不超過）5.0 %，倍他米松和地塞米松的分離度NLT（不小于）1.5。實驗結(jié)果比較，Kinetex 1.7μm C18核-殼型液相色譜柱在滿足分離度需求的同時，保留時間更短。
LC-UV 條件
色譜柱：Kinetex 1.7 μm C18 (00D-4475-AN)
尺寸：100 x 2.1 mm
貨號：00D-4605-AN
流動相：
-
A ：3.4 g/L 磷酸二氫鉀水溶液. 用磷酸調(diào)節(jié)至PH值為3.0
-
B ：乙腈
梯度：
流速：0.4 mL/min
溫度：35 °C
檢測器：UV @ 240 nm
進樣量：2 μL
樣品：見下方各色譜圖標(biāo)注
圖表1:系統(tǒng)適用性溶液(含量測定與有機雜質(zhì)測定方案一致) 使用 Kinetex® 1.7 μm C18（上）和某品牌1.7μm C18（下）
結(jié)果：系統(tǒng)適用性方案 (Assay and Organic Impurities)
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Kinetex 1.7μm C18 |
某品牌 1.7μm C18 |
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分析物 |
保留時間，min |
分離度, NLT 1.5 |
保留時間, min |
分離度, NLT 1.5 |
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倍他米松 |
6.63 |
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8.16 |
|
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地塞米松 |
7.06 |
2.18 |
8.71 |
2.40 |
圖表2:標(biāo)準(zhǔn)溶液 (含量測定) 使用 Kinetex® 1.7 μm C18（上）和某品牌1.7μm C18（下）
結(jié)果：標(biāo)準(zhǔn)溶液, 含量測定
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Kinetex 1.7μm C18 |
某品牌 1.7μm C18 |
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分析物 |
保留時間，min |
RSD, NMT 0.73% |
保留時間, min |
RSD, NMT 0.73% |
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地塞米松 |
7.04 |
0.53% |
8.69 |
0.43% |
圖表 3: 標(biāo)準(zhǔn)溶液 (有機雜質(zhì)) 使用 Kinetex® 1.7 μm C18（上）和某品牌1.7μm C18（下）
結(jié)果：標(biāo)準(zhǔn)溶液, 有機雜質(zhì)
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Kinetex 1.7μm C18 |
某品牌 1.7μm C18 |
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分析物 |
保留時間，min |
RSD, NMT 5.0% |
保留時間, min |
RSD, NMT 5.0% |
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倍他米松 |
6.62 |
1.35% |
8.15 |
1.80% |
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地塞米松 |
7.05 |
3.98% |
8.70 |
4.15% |
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去氧西米松 |
12.30 |
1.09% |
12.87 |
0.62% |
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醋酸地塞米松 |
13.81 |
1.15% |
14.16 |
0.33% |