本實驗建立了豬肉中22種β-受體激動劑的前處理方法，采用Agela新產品Cleanert^® LipoNo結合液相色譜串聯質譜的檢測方法，對豬肉中的β-受體激動劑進行了測定。樣品經酶解和提取處理后，用Cleanert^® LipoNo進行凈化，Kinetex F5(2.6 µm，3.0 × 50mm)色譜柱進行檢測，外標法定量。結果表明，當加標量為5 µg/kg時，回收率在60% ~ 100%之間，能夠滿足檢測要求。

主要儀器設備：

AB SCIEX API 4000+液相色譜串聯質譜儀（LC-MS/MS）

試劑材料：

乙腈、乙酸銨均為色譜純；乙酸、氨水、無水硫酸鎂為分析純；

2 mol/L乙酸銨溶液（pH 5.2）：稱取15.4 g乙酸銨，加水溶解并定容至100 mL，用乙酸調節pH至5.2；

22種β-激動劑混合標準溶液；

β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶：94550 units/mL；

Cleanert^® LipoNo（P/N：MS-LN0415）。

樣品提取：

稱取2 g已均質好的樣品，加入8 mL 2 mol/L乙酸銨緩沖液（pH 5.2）和40 μL酶解液，渦旋混勻1 min，37℃水浴酶解12小時，取出冷卻至室溫，加入10 mL 1%氨水乙腈（V/V）和1.5 g無水硫酸鎂，手動振搖1 min，8000 r/min離心5 min。

將全部上清液轉移至Cleanert LipoNo凈化管(P/N：MS-LN0415)中，手動振搖1 min。靜置1 min后移取5 mL上清液于45℃下氮吹至干，殘渣加0.1%甲酸復溶，經0.22 μm尼龍針式過濾器過濾，待檢測。

色譜條件

色譜柱：Kinetex F5，2.6 µm，3.0 × 50 mm；

柱溫：35℃；

流速：0.4 mL/min；

樣量：10 µL；

梯度條件：見表1。

表1. 梯度條件

離子源：ESI+；電噴霧電壓：5500V；霧化氣壓力：50 psi；氣簾氣壓力：10 psi；輔助氣壓力：60 psi；離子源溫度：550℃；采集方式：多反應監測(MRM)

由表3可知，采用Cleanert LipoNo結合LC-MS/MS的方法檢測豬肉中22種β-受體激動劑，加標回收率在60% ~ 100%之間，能夠滿足檢測要求。由色譜圖可知，用Kinetex F5檢測22種β-受體激動劑，峰形良好且保留時間穩定。